Что является SYBR Green®?
SYBR Green® флуоресцентная краска, которая затвердевает к двухцепочечной ДНК большой спецификой. Это широко используется в исследовании молекулярной биологии, чтобы определить количество и визуализировать двухцепочечную ДНК. SYBR Green® синтетический краситель, который был представлен в ранних 1990 с Молекулярным Probes®, Inc., филиал Invitrogen&trade Корпорация. Это - асимметричная краска цианина, цианины, являющиеся семьей синтетических органических пигментов, которые используются в фотографии, CD-R и среде DVD-R, и во множестве приложений исследования молекулярной биологии.
Несколько особенностей делают SYBR Green® особенно полезный как окраска нуклеиновой кислоты. Это устойчиво по пределам колебания температур, что означает, что это может использоваться, чтобы контролировать биохимические реакции, которые имеют место при высоких и низких температурах. Это затвердевает нековалентно на поверхность ДНК, которая является средствами, что это не будет вмешиваться с деятельностью большинства нуклеаз и полимераз ДНК. Это также затвердевает к нуклеиновым кислотам по динамическому линейному диапазону до четырех порядков величины, таким образом, это может дать точный количественный анализ ДНК по в широких пределах из концентраций.
Наиболее распространенное лабораторное использование SYBR Green® должны обнаружить двухцепочечную ДНК в режиме реального времени цепная реакция полимеразы (PCR) и в гелях акриламида. PCR - методика, чтобы усилить несколько копий ДНК через повторные циклы репликации ДНК. Оперативный PCR измеряет увеличение, как это имеет место, и начиная с SYBR Green® затвердевает к двухцепочечной ДНК, измеряя эмиссию флюоресценции комплексного соединения краски ДНК позволяет исследователю определять количество количества производимой ДНК. Как прогресс циклов PCR, есть увеличение флюоресценции, пропорциональной на сумму произведенного изделия PCR.
Гели акриламида являются вездесущими в лабораториях молекулярной биологии, поскольку они служат обычно необходимой цели отделить фрагменты ДНК размером. SYBR Green® позволяет исследователю визуализировать ДНК в геле акриламида, сияя свет соответствующей длины волны на этом. Другое использование SYBR Green® включайте обнаружение нуклеиновых кислот в растворе, в приложениях биочипа, и в цитометрии потока. Комплексное соединение краски ДНК абсорбирует синий свет в 488 нм и испускает зеленый свет в 522 нм
SYBR Green® очень чувствительно; это в 25 раз более чувствительно чем бромид этидия, другая обычно используемая краска для того, чтобы визуализировать ДНК. Высокое сродство SYBR Green® поскольку двухцепочечная ДНК делает это полезным для обнаружения образцов ДНК с низким числом копий. Это предпочтительно связывает двухцепочечную ДНК, но это может также связать одноцепочечную ДНК восстановленной флюоресценцией. Как с любой ДНК обязательная молекула, SYBR Green® может вызвать мутации и возможное канцерогенное вещество., однако, более безопасно работать с и легче избавиться чем бромид этидия.